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PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)基本配置及要求

10.14.2022
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一、PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)基本配置

1.主體結(jié)構(gòu):

主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽(yáng)角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁,從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問(wèn)題。結(jié)構(gòu)牢固,線(xiàn)條簡(jiǎn)明,美觀(guān)大方,密封性好。

2.標(biāo)準(zhǔn)的三區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié):

將PCR過(guò)程分成試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備和PCR擴(kuò)增檢測(cè)三個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)。整個(gè)區(qū)域有一個(gè)整體緩沖走廊。每個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū),同時(shí)各區(qū)通過(guò)氣壓調(diào)節(jié),使整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染并降低擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和環(huán)境的污染。

可打開(kāi)緩沖區(qū)Ⅰ,緩沖區(qū)Ⅱ和 PCR 擴(kuò)增區(qū)的排風(fēng)扇往外排氣,在實(shí)驗(yàn)區(qū)的外墻上和各扇門(mén)上都安裝有風(fēng)量可調(diào)的回風(fēng)口,空氣通過(guò)回風(fēng)口向室內(nèi)換氣。

3.機(jī)械連鎖不銹鋼傳遞窗:

試劑和標(biāo)本通過(guò)機(jī)械連鎖不銹鋼(不建議使用電子連鎖方式)傳遞窗傳遞,保證試劑和標(biāo)本在傳遞過(guò)程中不受污染(人物分流)。

4.消毒:

在三個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)和三個(gè)緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈,供消毒用。

在試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū) 還設(shè)置移動(dòng)紫外線(xiàn)燈,對(duì)實(shí)驗(yàn)桌進(jìn)行局部消毒。

5.照明

燈具要選用凈化燈具,能達(dá)到便于清洗、不積塵的特點(diǎn)。

標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的過(guò)程中應(yīng)注意:

①?lài)?yán)格按照規(guī)范科學(xué)設(shè)計(jì)的安裝流程。

②規(guī)范的安裝流程和全面的服務(wù)流程。

③安裝前需要確定以下安裝條件,如:電源電壓,電源進(jìn)線(xiàn)位置,電話(huà)網(wǎng)絡(luò)線(xiàn)進(jìn)線(xiàn)位置,進(jìn)水水壓,最小安裝空間,地面平整度,通風(fēng)孔、進(jìn)水管和下水管的位置等,理想狀態(tài)的空間尺寸和通風(fēng)口尺寸。

6.地面

地面建議使用PVC卷材地面或自流坪地面,整體性好。便于進(jìn)行清掃,耐腐蝕。沒(méi)有條件的也可采用水磨石地面,或大塊的瓷磚(至少800mm×800mm)接縫需要小于2mm。

二、PCR 實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)基本要求

1.標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)物分析區(qū)或三個(gè)區(qū)域的最后一個(gè)區(qū)域(即擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)),空氣流向應(yīng)由室外向室內(nèi),可通過(guò)在室內(nèi)設(shè)置通風(fēng)櫥、排風(fēng)扇或其他排風(fēng)系統(tǒng)達(dá)到空氣流由室外向室內(nèi)流動(dòng)的要求。

2.PCR 實(shí)驗(yàn)室依據(jù)所使用的方法可分為試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備、擴(kuò)增、產(chǎn)物分析等三或四個(gè)區(qū)域。只是使用實(shí)時(shí)熒光PCR儀、HIV病毒載量測(cè)定儀的PCR實(shí)驗(yàn)室,有上述前面三個(gè)區(qū)域即可。各區(qū)域應(yīng)完全獨(dú)立分隔,不應(yīng)有任何的空氣直通。

3.PCR實(shí)驗(yàn)室各區(qū)域儀器設(shè)備配備通常如下:

①標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本制備區(qū)

儀器設(shè)備主要應(yīng)有生物安全柜(最好為B2, 可避免提取核酸在柜內(nèi)反復(fù)循環(huán),造成標(biāo)本間交叉“污染”,出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。此外還應(yīng)配備加樣器、臺(tái)式高速離心機(jī)(冷凍及常溫)、臺(tái)式低速離心機(jī)、恒溫設(shè)備(水浴和/或干浴儀)、冰箱、混勻器和可移動(dòng)紫外燈等。

②標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室試劑準(zhǔn)備區(qū):

儀器設(shè)備主要應(yīng)有加樣器、冰箱、天平、低速離心機(jī)、混勻器、可移動(dòng)紫外燈等??墒褂贸瑑艄ぷ髋_(tái)作為試劑配制操作臺(tái)面。

③標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)物分析區(qū):

本區(qū)所使用的儀器設(shè)備可能有加樣器、電泳儀(槽)、電轉(zhuǎn)印儀、雜交爐或雜交箱、水浴箱、DNA測(cè)序儀、酶標(biāo)儀和洗板機(jī)等。

在理想情況下,PCR實(shí)驗(yàn)室試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備、擴(kuò)增三個(gè)區(qū)域可設(shè)置緩沖間。在緩沖間內(nèi),可設(shè)置正壓,使室內(nèi)空氣不流向室外,室外空氣不流向室內(nèi)。

④標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增區(qū)

主要儀器就是核酸擴(kuò)增熱循環(huán)儀(PCR儀,實(shí)時(shí)熒光或普通的)。熱循環(huán)儀的電源應(yīng)專(zhuān)用,并配備一個(gè)穩(wěn)壓電源或UPS,以防止由于電壓的波動(dòng)對(duì)擴(kuò)增測(cè)定的影響。此外,根據(jù)工作需要,還可配備加樣器、超凈臺(tái)等。
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